混合淋巴细胞培养试验

混合淋巴细胞培养试验的基本信息

1、定义

混合淋巴细胞培养试验(mixedlymphocyteculture,MLC)是一种测定受体和供体主要组织相容性抗原(HLA抗原)相容程度的试验方法,常用于器官移植前的组织配型。混合淋巴细胞培养将供者与受者的淋巴细胞做双向混合培养,或者灭活供者的淋巴细胞做向混合培养,细胞反应的程度与供-受者相容的程度呈负相关的试验。

2、专科分类

生长发育检查

3、检查分类

免疫检查

4、适用性别

男女均适用

5、是否空腹

非空腹

混合淋巴细胞培养试验的正常值和临床意义

1、正常值

形态计数法: 转化率<10%;同位素计数法:比较cpm得出P>0.05。

2、临床意义

混合淋巴细胞培养试验为与供-受者相容的程度呈负相关的试验。异常结果:肾移植时,活体供肾者的转化率应<10%;尸体供肾者的转化率应为>10%。只能在同一批实验中选用低反应配组。淋巴细胞转化率10%者为不同两个体间的组织是相容的。淋巴细胞混合培养试验用以检测患者的免疫状态。T淋巴细胞数减少时,转化率也降低。 可作为器官和骨髓移植的配型方法之一,用来选择合适的供体。如转化率高为供受者分歧用。转化率低,移植后的成功率高。

混合淋巴细胞培养试验的检查过程及注意事项

1、检查过程

供体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。 生理盐水洗涤2次。 台盼蓝染色,计数板计数。 调整细胞密度为2×109/L,分成3管,各自离心,留取沉淀。 每管中加入250 μL丝裂霉素(终浓度50 mg/L)和1.75 mL生理盐水,37℃水浴40 min, 生理盐水离心洗涤2次。 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液调整细胞密度为1×1010/L.加入抗体封闭抗原。标记为D。

受体淋巴细胞的制备:

新鲜外周静脉血按1∶1比例加在装有比重为1.077的淋巴细胞分离液的离心管中,轻稳加在液面上。 2000 r/min离心20 min,吸取中间雾状淋巴细胞层。 生理盐水洗涤2次。 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培养液调整细胞密度为1×1010/L. 标记为R。

混合淋巴细胞培养:

将已制备好的R和D按如下分组加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培养24 h. A组:R 50 μL+D 50 μL;B组:R 50 μL+D 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;C组:R 50 μL+IL?2纯化中和mAb 15 μL;D组:R 50 μL. 每组3个复孔,空白对照组为RPMI 1640培养液100 μL。

2、注意事项

本试验可作为器官移植筛选供体的方法,转化率低者移植成功率高,转化率高者成功率低。

混合淋巴细胞培养试验的相关疾病和症状

1、相关疾病

获得性免疫缺陷综合征的神经系统表现,免疫缺陷性肺炎,Ⅱ型免疫母细胞性淋巴腺病,Ⅰ型免疫母细胞性淋巴腺病,小儿血管免疫母细胞淋巴结病,小儿高免疫球蛋白E综合征,小儿选择性免疫球蛋白A缺乏症,小儿选择性免疫球蛋白G亚类缺陷病,小儿原发性免疫缺陷病,小儿继发性免疫缺陷病

2、相关症状

免疫损害,免疫性肾炎,血清免疫球蛋白可升高,正常免疫球蛋白减少,免疫功能障碍,免疫缺陷,免疫力下降,免疫性溶血,免疫力降低

混合淋巴细胞培养试验的不适宜人群和不良反应

1、不适宜人群

排斥反应大的人。

2、不良反应

暂无相关并发症和危害。