腦脊液特異性梅毒螺旋體抗體

腦脊液特異性梅毒螺旋體抗體的基本信息

1、定義

梅毒螺旋體(treponema pallidum,TP)屬密螺旋體屬,是人類梅毒的病原體,梅毒是人類的主要性病之一。梅毒患者血清中有兩類抗體;一類是反應素,是IgA與IgM型混合抗體,能與哺乳動物心肌提取的心類脂抗原發生非特異反應,對機體無保護作用,但可供血清學診斷篩選試驗用。另一類是梅毒螺旋體特異性抗體,在厭氧條件下和有補體存在時,能抑制活的梅毒螺旋體運動,并能將其殺死或溶解,可以用來對梅毒進行確證實驗。梅毒螺旋體培養非常困難,故主要用血清學診斷方法進行診斷。

本法是標記抗原(Ag·)和非標記抗原(Ag)對特異性抗體(Ab)的競爭抑制反應,其反應為Ag·+Ag+Ab(Ag·Ab)+(AgAb)。當Ag·和Ab的量保持恒定,Ag與Ag·之和大于Ab上的有效結合點的數目,在該條件下,Ag與Ag·間存在著函數關系,亦即隨著Ag濃度增加,Ag-Ab生成量多,而Ag·-Ab的數量則減少,游離的Ag·就增多。因為Ag·對Ab的結合,可因Ag競爭結合而遭抑制。反之,當Ag量少時,Ag-Ab生成量就少,Ag·-Ab量增多,而游離的Ag·減少。將結合的抗原抗體復合物(B)與游離抗原(F)分離,分別測定B和F的放射活性,計算出B/F或B/B+F值,可制出B/F或B/B+p對Ag量的關系曲線圖。測定時,需用一系列已知濃度的Ag和一定量Ag·及相應抗體Ab混合,然后測出各標準濃度Ag參加下的Ag·-Ab放射結合率(B/B+F)或(B/F),繪出競爭抑制標準曲線(圖2)。試驗時,在同樣條件下,根據被測Ag的放射性結合率,從標準曲線上查知相應Ag含量。

2、專科分類

無

3、檢查分類

腦脊液檢查

4、適用性別

男女均適用

5、是否空腹

空腹

腦脊液特異性梅毒螺旋體抗體的正常值和臨床意義

1、正常值

陰性。

2、臨床意義

梅毒螺旋體是梅毒的致病原,一經感染可引起機體的免疫功能發生一系列變化。梅毒螺旋體侵入人體48h后,血液中即可產生特異性抗體。但也可產生非特異性抗心擬脂反應素,反應素的性質與抗體相似。這種抗體最初為IgM,繼之出現的為IgG及IgA,有些病人還可檢出IgE類抗體。此類抗體除IgM,既使經過足量抗梅毒治療,仍能持續存在甚至終身保留。因此不適用于觀察療效、復發及再感染。但經治療后IgM比抗心凝脂抗體消失快,因此它的存在是活動性梅毒的一個指征。

腦脊液特異性梅毒螺旋體抗體的檢查過程及注意事項

1、檢查過程

本法分三個步驟,即抗原與抗體反應、B和F分離和放射性測定。

抗原與抗體反應:將標本(非標記抗原)、標記抗原和抗血清順序定量加入小試管內,置室溫(15～30℃)作用24h,使其充分競爭結合。

B、F分離:分離技術多種多樣,常用沉淀法。①第二抗體沉淀法:又稱雙抗體法,在受檢抗原與第一抗體特異性反應后加入相應的第二抗體,使形成的抗原-第一抗體-第二抗體的復合物共沉,一經離心即可使結合標記抗原B與游離抗原F分離。本法是特異性沉淀,分離完全,非特異性結合力低。但第二抗體用量較大,成本較高。此外標本濃度、抗凝劑的有無因素可在一定程度上影響結果。②聚乙二醇(PEG)沉淀法:使蛋白質處于等電點狀態,水化層破壞而導致蛋白質沉淀。本法優點是PEG制備方便、價廉、分離快速,缺點是非特異沉淀物較多,分離不完全。③第二抗體-聚乙二醇沉淀法:本法既有PEG法的快速沉淀優點,且保持第二抗體特異性沉淀的作用,又減少第二抗體用量,并降低PEG濃度,使非特異沉淀物減少。④活性炭吸附法:利用活性炭表面活性將小分子的游離部分吸附。如在活性炭表面涂上一層葡聚糖,使它表面具有一定孔徑的網眼,從而允許小分子游離抗原或半抗原逸入而被吸附,而大分子復合物則被排斥在外。在抗原與抗體反應后,加入葡聚糖-活性炭,放置5～10min,使游離抗原吸附在活性炭顆粒上,離心使顆粒沉淀,上清液中含有結合的標記抗原。

放射性強度測定:B和F分離后,即可測定其放射性強度。測量儀器有兩類:液體閃爍計數儀(測β射線)和晶體閃爍計數儀(測γ射線)。計數單位是探測器輸出的電脈沖數,單位為cpm(脈沖數/min)。

每次測定均需作一標準曲線圖,以標準抗原的不同濃度為橫坐標,以測到的相應放射性強度為縱坐標作圖。放射性強度可任選B或F,亦可采用計算值B/B+F、B/F或B/B0。標本應作雙份測定,取其平均值,在標準曲線上查出相應的受檢抗原濃度。