血清蛋白電泳

血清蛋白電泳的基本信息

1、定義

血清蛋白電泳即用電泳方法測定血清中各類蛋白占總蛋白的百分比。對于肝、腎疾病和多發性骨髓瘤的診斷有意義。

血清含有各種蛋白質,其等電點均在pH7.5以下,若置于pH8以上的緩沖液電泳時均游離成負離子,再向正極移動。由于其等電點,分子量和分子形狀各不相同,其電泳速度就不同。故可將血清中蛋白質區分開來。分子量小,帶電荷多者,泳動速度最快。按其游動速度順序把血清蛋白粗略分為清蛋白,α1、α2、β及γ球蛋白。正常值見表,臨床上血清白蛋白減少與γ球蛋白增高為肝病患者血清蛋白電泳所共有的現象,其減少與增加的程度和肝炎的損傷的范圍相并行。急性肝炎早期無變化,發病第二周后即有血清蛋白的改變,慢性肝炎較急性肝炎變化明顯,肝硬化變化則更為明顯。因此,血清蛋白的變化對疾病診斷和預后的評估具有重要的臨床意義。

2、專科分類

消化

3、檢查分類

生化檢查

4、適用性別

男女均適用

5、是否空腹

空腹

血清蛋白電泳的正常值和臨床意義

1、正常值

瓊脂糖法: 白蛋白48%-64% 1-球蛋白2.5%-5.4% 2-球蛋白8.3%-l4% -球蛋白8.7%-l5% -球蛋白12%-l5%

醋酸纖維薄膜法: 白蛋白57%-68% 1-球蛋白0.8%-5.7% 2-球蛋白4.9%-11.2% -球蛋白7.0%-l3% -球蛋白9.8%-18.2%

2、臨床意義

白蛋白減少:見于慢性肝炎、肝硬化、肝癌等。

α1球蛋白(糖蛋白)增高:見于原發性肝癌。在重型肝炎、肝硬化、肝昏迷時則減少,與白蛋白呈正相關。肝病時測定α1球蛋白對判斷肝炎的嚴重程度和預后有參考價值。一般情況下,α1球蛋白增加示病情較輕,α1球蛋白減少則提示病情較重,在嚴重肝功能衰竭時,其血清含量可顯著降低。

α2球蛋白:病毒性肝炎初期無明顯變化,一周后逐漸增加,亞急性肝炎和急性肝壞死、失代償期肝硬化則減少。

β球蛋白增高:見于脂肪肝、高脂血症、腎病綜合征、糖尿病合并高膽固醇血症、梗阻性黃疸、惡性腫瘤。在膽汁淤積性肝病時其含量升高,與α2球蛋白升高相平行。降低于見于急、慢性肝炎,肝硬化,尤以失代償期肝硬化和壞死肝硬化下降最為顯著。

γ球蛋白增高:見于慢性肝炎、肝硬化、肝膽疾患。典型肝硬化尚可見β和γ帶相融合,形成β-γ橋。肝病患者γ球蛋白的變化可反映病情的嚴重程度。隨病情好轉,其含量可逐漸降至正常,如一直在高水平持續不降,提示病情嚴重,預后不良,并有向慢性肝炎及肝硬化發展的趨勢。此外,感染、血吸蟲病、多發性骨髓瘤、結締組織病等也可升高。降低見于丙種球蛋白缺乏症、部分化療患者等。

另外,多發性骨髓瘤在β球蛋白區帶與γ球蛋白區帶之間常出現M球蛋白帶;雙白蛋白血症可見雙條白蛋白區帶。

血清蛋白電泳的檢查過程及注意事項

1、檢查過程

將緩沖液加入電泳槽內,調節兩側槽內的緩沖液,使其處于同一平面。

醋酸纖維素薄膜的準備:取醋酸纖維素薄膜(2cm×8cm)在毛面的一端(負極側)1.5cm處用鉛筆輕劃一橫線,做點樣標記。編號,并標明正、負極后,將薄膜置于巴比妥-巴比妥鈉緩沖液中浸泡,待充分浸透后(一般為20min)取出,夾于潔凈濾紙中間吸去多余的緩沖液。

將醋酸纖維素薄膜毛面向上貼于電泳槽支架上拉直。用微量吸管吸取無溶血血清3～5μl于橫線處沿橫線加樣,樣品應與薄膜的邊緣保持一定的距離,以免電泳圖譜中的蛋白區帶變形,待血清滲入薄膜后,反轉薄膜,使光面朝上,平直地貼于電泳槽支架上,用雙層濾紙或四層紗布將薄膜的兩端與緩沖液連通,稍待片刻。

接通電源,注意醋酸纖維素薄膜上的正、負極,切勿接錯。電壓90～150v,電流0.4～0.6mA/cm(不同的電泳儀所需電壓,電流可能不同,應靈活掌握),夏季通電45min,冬季通電時間稍長,約為60min,電泳區帶展開約25～35mm即可。

染色:通電完畢,取下薄膜直接浸于麗春紅S染液或氨基黑10B染色液中,染色5～10min(以白蛋白區帶染透為止),然后在漂洗液中漂去剩余染料,直至背景無色為止。

定量:

比色法:將漂洗的薄膜吸干,剪下各染色的蛋白區帶入相應的試管中,在白蛋白管中加0.4mol/L氫氧化鈉6ml(計算時吸光度乘以2),其余各管加3ml,振搖數次,置37℃水箱20min使其色澤浸出。氨基黑10B染色用分光光度計在620nm處讀取各管吸光度,然后計算出各管的含量(同時做空白管對照)。

麗春紅S染色時浸出液用0.1mol/L氫氧化鈉,加入量同上法。10min后,白蛋白管內加400ml/L醋酸0.6ml(計算吸光度時乘以2),其余各管加0.3ml,以中和部分氫氧化鈉,使色澤加深,必要時離心,取上清液用分光光度計在520nm處讀取各管的吸光度(同時作空白對照),然后計算各自的含量。

光密度計掃描法:A.透明:吸去薄膜上的漂洗液(為防止透明液被稀釋影響透明結果),將薄膜浸入透明液中2～3min,然后取出,以滾動的方式平貼于潔凈無劃痕的載物玻璃片上(切勿產生氣泡),將此玻片豎立片刻,除去多余透明液后,置于恒溫90℃至100℃的烘箱內,烘烤10～15min,取出冷卻至室溫,用此法透明的各蛋白區帶鮮明,薄膜平整,可供直接掃描和永久保存(用氫萘或液體石蠟透明,應將漂洗過的薄膜烘干后進行透明,此法透明的薄膜不能存久,且易發生皺折)。B.掃描定量:將已透明的薄膜放入全自動光密度計或其他光密度計暗箱內,進行掃描分析。

2、注意事項

空腹12小時,抽取靜脈血化驗,標本一定要新鮮血液。化驗前要告知醫生近期所服用的藥物以及近期的生理改變。

血清蛋白電泳的相關疾病和症狀

1、相關疾病

抗胰蛋白酶缺乏症,單克隆丙種球蛋白病伴周圍神經病,急性間質性肺炎,系統性紅斑狼瘡所致脊髓病,慢性淋巴細胞性甲狀腺炎,黃瘤,類風濕性關節炎,腎病綜合征,肝硬化,大動脈炎

2、相關症狀

蜘蛛蠱,煙酸缺乏,腹脹,尿失禁,遺尿,脊柱和四肢畸形,關節疼痛,黃疸,腹部腫塊,腹痛

血清蛋白電泳的不適宜人群和不良反應

1、不適宜人群

無。

2、不良反應

無。