混合淋巴細胞培養試驗

混合淋巴細胞培養試驗的基本信息

1、定義

混合淋巴細胞培養試驗(mixedlymphocyteculture,MLC)是一種測定受體和供體主要組織相容性抗原(HLA抗原)相容程度的試驗方法,常用于器官移植前的組織配型。混合淋巴細胞培養將供者與受者的淋巴細胞做雙向混合培養,或者滅活供者的淋巴細胞做向混合培養,細胞反應的程度與供-受者相容的程度呈負相關的試驗。

2、專科分類

生長發育檢查

3、檢查分類

免疫檢查

4、適用性別

男女均適用

5、是否空腹

非空腹

混合淋巴細胞培養試驗的正常值和臨床意義

1、正常值

形態計數法: 轉化率<10%;同位素計數法:比較cpm得出P>0.05。

2、臨床意義

混合淋巴細胞培養試驗為與供-受者相容的程度呈負相關的試驗。異常結果:腎移植時,活體供腎者的轉化率應<10%;尸體供腎者的轉化率應為>10%。只能在同一批實驗中選用低反應配組。淋巴細胞轉化率10%者為不同兩個體間的組織是相容的。淋巴細胞混合培養試驗用以檢測患者的免疫狀態。T淋巴細胞數減少時,轉化率也降低。 可作為器官和骨髓移植的配型方法之一,用來選擇合適的供體。如轉化率高為供受者分歧用。轉化率低,移植后的成功率高。

混合淋巴細胞培養試驗的檢查過程及注意事項

1、檢查過程

供體淋巴細胞的制備:

新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中,輕穩加在液面上。 2000 r/min離心20 min,吸取中間霧狀淋巴細胞層。 生理鹽水洗滌2次。 臺盼藍染色,計數板計數。 調整細胞密度為2×109/L,分成3管,各自離心,留取沉淀。 每管中加入250 μL絲裂霉素(終濃度50 mg/L)和1.75 mL生理鹽水,37℃水浴40 min, 生理鹽水離心洗滌2次。 用含100 mL/L胎牛血清的RPMI 1640液調整細胞密度為1×1010/L.加入抗體封閉抗原。標記為D。

受體淋巴細胞的制備:

新鮮外周靜脈血按1∶1比例加在裝有比重為1.077的淋巴細胞分離液的離心管中,輕穩加在液面上。 2000 r/min離心20 min,吸取中間霧狀淋巴細胞層。 生理鹽水洗滌2次。 用含120 mL/L胎牛血清的RPMI 1640培養液調整細胞密度為1×1010/L. 標記為R。

混合淋巴細胞培養:

將已制備好的R和D按如下分組加入96孔板,置37℃,50 mL/L CO2孵箱中培養24 h. A組:R 50 μL+D 50 μL;B組:R 50 μL+D 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;C組:R 50 μL+IL?2純化中和mAb 15 μL;D組:R 50 μL. 每組3個復孔,空白對照組為RPMI 1640培養液100 μL。

2、注意事項

本試驗可作為器官移植篩選供體的方法,轉化率低者移植成功率高,轉化率高者成功率低。

混合淋巴細胞培養試驗的相關疾病和症狀

1、相關疾病

獲得性免疫缺陷綜合征的神經系統表現,免疫缺陷性肺炎,Ⅱ型免疫母細胞性淋巴腺病,Ⅰ型免疫母細胞性淋巴腺病,小兒血管免疫母細胞淋巴結病,小兒高免疫球蛋白E綜合征,小兒選擇性免疫球蛋白A缺乏症,小兒選擇性免疫球蛋白G亞類缺陷病,小兒原發性免疫缺陷病,小兒繼發性免疫缺陷病

2、相關症狀

免疫損害,免疫性腎炎,血清免疫球蛋白可升高,正常免疫球蛋白減少,免疫功能障礙,免疫缺陷,免疫力下降,免疫性溶血,免疫力降低

混合淋巴細胞培養試驗的不適宜人群和不良反應

1、不適宜人群

排斥反應大的人。

2、不良反應

暫無相關并發症和危害。